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细胞复苏注意事项

作者:天驰液氮罐 来源:原创 日期:2016-07-01 9:12:14 人气:24 加入收藏 标签:细胞复苏

  注意事项:

  1、注意无菌操作

  2、细胞复苏时融化冻存细胞速度要快,防止细胞损伤,细胞复苏后的操作最好在适宜温度中进行,减少冷冻保护剂对细胞的毒性。

  3、为了避免复苏过程中细胞液中有冰晶的出现,破坏细胞膜及细胞内部结构。从液氮拿出来,要快速丢入37度水浴,等细胞液刚刚化完取出,加培养液稀释。

  4、细胞放入水浴中注意用镊子夹住细胞冻存管并在水浴中不时晃动,使其受热均匀,并防止水浴时水进入细胞冻存管污染细胞。打开细胞冻存管之前要用酒精棉球将冻存管消毒并晾干。

  5、液氮一定的危险性,打开液氮罐取出细胞时,要注意防冻,戴防冻手套,防护眼睛。

  6、如果冻存管密封不严,液氮可被吸入。由于解冻时冻存管中的气温急剧上升,将可能发生爆炸。复苏过程中应盖上恒温水浴锅的盖。

  细胞复苏后贴壁细胞较少的原因:

  1、冻存细胞时消化时间过长,导致细胞复苏时失去铁壁能力。

  2、细胞冻存液的质量不好也会导致细胞死亡。

  3、冻存液的量加的太多也不好。

  4、冻存的时候把DMSO混均匀,会有一些影响,但不会太大。

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